Проверьте зрение за 5 минут, не отходя от компьютера →
Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э

Определение сывороточной липазы по Комфорту

Принцип. Посредством титрования n/20 раствором едкого натра определяется количество оливкового масла, расщепленного липазой, содержащейся в 1 мл сыворотки.

Методика выполнения.

Необходимые реактивы:

а) масляная эмульсия, приготовленная встряхиванием равных частей свободных от жирных кислот оливкового масла и 5% раствора гуммиарабика с добавлением 0,2% раствора бензойнокислого натрия;

б) фосфатный буферный раствор по Серенсену, рН — 7.

В пробирке смешивают 1 мл сыворотки с 2 мл реактива «а» + 3 мл Н2О и 0,5 мл реактива «б» и ставят на 24 часа в термостат. Через 24 часа добавляют в эту смесь 3 мл спирта и титруют раствором n/20 едкого натра с 1 % спиртовым раствором фенолфталеина в качестве индикатора.

Одновременно ставят контрольный опыт: 1 мл сыворотки с 3 мл воды подогревают в течение 5 минут при температуре 70о для разрушения липазы. Дальнейшая обработка такая же, как описано выше.

Расчет. Расход n/20 едкого натра на подопытный раствор минус расход n/20 едкого натра на контрольный опыт.

Оценка. В норме расходуется 0,2 — 1,5 мл едкого натра. При остром панкреатите требуется 10 мл и больше. В отличие от сывороточной диастазы возврат к норме совершается медленно, так что повышенные цифры могут сохраняться в течение 10 — 14 дней. Количество липазы повышено также при раке поджелудочной железы и при холангите.

Примечание. Определение липазы и липолитических ферментов возможно также и сталагмометрическим путем по Рона и Михаэлису при помощи раствора трибутирина, поверхностное натяжение которого при добавлении липазы повышается.

Главный недостаток определения панкреатических ферментов в дуоденальном соке заключается в том, что последний не является чистым продуктом поджелудочной железы, а представляет собой смесь из слюны, желудочного сока, желчи, секрета поджелудочной железы и тонких кишок.

Все исследования, при которых довольствуются только однократной пробой, имеют поэтому сомнительную ценность. Однако они могут быть применены, например, в педиатрической практике для диагностики кистозного фиброза поджелудочной железы, при котором имеется полное отсутствие ферментов. Для всех других клинических целей безусловно необходимо применять фракционное определение ферментов, которое позволяет гораздо глубже проникнуть в динамику внешней секреции поджелудочной железы. При этом следует предпочесть быстрое фракционное определение ферментов [по Бергеру], при котором сок извлекают каждые 5 минут, так как таким способом можно легко отделить содержимое тонкого кишечника от поступающего в него желудочного сока. Перемешивание этих соков, как известно из опыта, происходит лишь спустя некоторое время.

Графическое изображение полученных данных в виде кривых имеет то преимущество, что позволяет сразу составить представление о секреторной деятельности поджелудочной железы.

Многочисленные определения ферментов, необходимые в каждом отдельном исследовании, требуют значительной затраты времени, однако в крупных лабораториях или при использовании фотоэлектрических методов эти определения проводить нетрудно.


Ссылка на данную страницу для форума:
Ссылка на данную страницу для блога:

Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э
Посвящается моему деду, доктору Фролову В.М. (1939-2014) Не пользуйтесь материалами сайта без консультации специалиста!