Проверьте зрение за 5 минут, не отходя от компьютера →
Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э

Определение бромсульфалеина крови по Кинле и Кнюхелю

Реактивы.

1. Бромсульфалеин в ампулах (5% раствор, содержащий в 0,1 мл 5 мг).

2. 5% раствор едкого натра.

3. 5% раствор соляной кислоты.

Приготовление шкалы для сравнения; 10 мг бромсульфалеина разводят в 80 мл дистиллированной воды и смешивают с 0,25 мл 10% раствора едкого натра, после чего доливают воды до 100 мл. Таким образом получают 100% стандартный раствор, из которого приготовляют ряд разведений от 5 до 100% посредством соответствующих разбавлений подщелоченной дистиллированной водой. Необходимы нижеприводимые разведения (см. стр. Определение бромсульфалеина крови по Кинле и Кнюхелю).

Техника. Из каждой пробы сыворотки переносят равные количества в две пробирки (такого же размера, как и пробирки со стандартным раствором). К одной из этих двух пробирок добавляют 2 капли раствора едкого натра (2), к другой — 2 капли раствора соляной кислоты (3).

Оценка. Интенсивность полученного окрашивания измеряют при искусственном освещении на белом фоне следующим образом.

№ пробирки

% стандарта

Количество красящего вещества в мл

Количество подщелоченной воды в мл

1

5

0,25

4,75

2

10

0,50

4,50

3

15

0,75

4,25

4

20

1,00

4,00

5

30

1,50

3,50

6

40

2,00

3,00

7

50

2,50

2,50

8

60

3,00

2,00

9

70

3,50

1,50

10

80

4,00

1,00

11

100

5,00

0,00

Исследующий держит на белом фоне подкисленную пробирку прямо перед собой впереди пробирки для сравнения (контроль), а рядом с первой пробиркой — пробирку со щелочью. Таким способом можно подобрать ту из контрольных пробирок, интенсивность цвета в которой больше всего приближается к таковой пробирки с сывороткой. Нанесенные на пробирку и приведенные в графе таблицы «% стандарта» цифры указывают процентное содержание пигмента, оставшегося через 30 минут. Бромсульфалеин дает красное окрашивание только в щелочной среде. Так как в некоторых пробах сыворотки отсчет затруднителен вследствие их собственного цвета или легкого помутнения, оттенок цвета пробирки для сравнения надо подбирать в зависимости от цвета пробирки с подкисленной пробой исследуемой сыворотки. По той же причине фотометрическое определение только тогда дает точные результаты, когда интенсивность цвета содержащегося в сыворотке бромсульфалеина калибрована по отношению к цвету подкисленной контрольной пробы той же сыворотки.

Кривую калибровки для фотометрического измерения получают фотометрированием стандартных проб с 1 по 11.


Ссылка на данную страницу для форума:
Ссылка на данную страницу для блога:

Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э
Посвящается моему деду, доктору Фролову В.М. (1939-2014) Не пользуйтесь материалами сайта без консультации специалиста!