Проверьте зрение за 5 минут, не отходя от компьютера →
Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э

Определение железа сыворотки по Хейльмейеру и Плетнеру

Принцип. Сывороточное железо, переведенное обработкой соляной кислотой в ионизированную форму, образует с о-фенантролином (o-Phenanthrolin) сложное соединение оранжево-красного цвета.

Реактивы.

1. Соляная кислота (концентрированная соляная кислота для анализа, разведенная равным объемом дважды дистиллированной воды).

2. 20% раствор трихлоруксусной кислоты.

3. 1 % спиртовый раствор р-нитрофенола.

4. Разведенный аммиак (15 — 20 мл 10% аммиака для анализа, разведенного до 100 мл).

5. n/2 серная кислота.

6. 2% раствор гидрохинона (0,2 г высокоочищенного гидрохинона растворяют при легком подогревании в 10 мл дважды дистиллированной воды и подкисляют несколькими каплями серной кислоты).

7.1% раствор хлоргидрата о-фенантролина «для определения железа». Раствор подкисляют несколькими каплями соляной кислоты.

Техника. В колбочке смешивают 2 мл сыворотки с 1 мл соляной кислоты, сильно встряхивают и оставляют стоять на 10 минут. После добавления 2 мл раствора трихлоруксусной кислоты и взбалтывания раствор еще раз оставляют стоять в течение 10 минут и затем фильтруют через фильтр диаметром в 7 см (Шлейхер и Шюлль № 589). 2,5 мл фильтрата пипеткой переносят в градуированную центрифужную пробирку емкостью в 10 мл, добавляют осторожно в качестве индикатора одну каплю раствора р-нитрофенола, осторожно нейтрализуют аммиаком и добавляют по каплям серной кислоты до исчезновения желтого окрашивания.

Затем добавляют 3 капли раствора гидрохинона и 3 капли раствора хлоргидрата фенантролина, точно отсчитывают объем VS раствора. Через 10 минут измеряют экстинкцию ЕS.

Толщина слоя — микро- или маленькая кювета в 5 см. Фильтр — S 50. Раствор для сравнения — Н2O.

При высоком содержании железа измеряют в слое толщиной 2 мл. Так как редко бывает, чтобы реактивы совершенно

не содержали железа, ставят контрольный опыт с реактивами, в которых вместо сыворотки берут 2 мл воды. При этом получают объем Vb и экстинкцию Еb.

Расчет. с = 500 (Кs х Vs — Кb x Vb) у железа в 100 мл сыворотки.

К сведению. Для получения надежных результатов важно во время работы соблюдать безукоризненную чистоту. Всю стеклянную посуду надо очистить хромовосерной смесью и после высушивания хранить в закрытом виде. Пробы крови следует брать полированными изнутри канюлями из стали марки V2A и ни в коем случае не шприцами. Кровь должна стекать прямо в чистые центрифужные пробирки.

Общее содержание железа в биологическом материале (кровь, моча, ткани) можно определять таким же способом после предварительного сжигания серной кислотой и пергидролем (или азотной кислотой).

Концентрация в полученном растворе в этом случае равна:

с = 0,5 мг% железа.

Это надо еще перечислить на содержание железа в исходном материале с учетом проведенного в процессе определения разведения.


Ссылка на данную страницу для форума:
Ссылка на данную страницу для блога:

Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э
Посвящается моему деду, доктору Фролову В.М. (1939-2014) Не пользуйтесь материалами сайта без консультации специалиста!