Проверьте зрение за 5 минут, не отходя от компьютера →
Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э

Элюция и расчет сывороточных белковых фракций

1. Разрезать полоску бумаги на отдельные фракции по месту наименьшего окрашивания и поместить каждую полоску в пробирку.

2. Налить в каждую пробирку 10 мл n/10 раствора едкого натра (5) (при сильно окрашивающихся фракциях, например альбуминовой фракции, налить 20 мл) и оставить стоять на 1 час для элюирования (время от времени помешивая).

3. Фотометрировать (измеряется экстинкция). Толщина слоя — 2 см. Фильтр — S 57. Контрольный раствор — Н2O.

Расчет. Сумма экстинкций всех фракций (причем экстинкцию фракции, обработанной 20 мл раствора едкого натра, следует удвоить) принимается как общая экстинкция за 100% и отсюда вычисляется процентное (относительное) содержание каждой фракции в отдельности по следующей формуле:

Рис. 96.

Примечания. 1. Все приведенные здесь технические детали относятся к сконструированной нами аппаратуре (выпрямитель тока и электрофоретические камеры) и к размерам нарезанных полосок бумаги (30 см х 5 см).

2. Для нанесения на очень чувствительную бумагу разведенной сыворотки мы применяем отшлифованное по узкой стороне (грани) предметное стекло, на которое сыворотку наносят посредством пипетки для сахара крови.

3. В нашем приборе наилучшее разделение сывороточных белков получается при напряжении тока 180 V и 3,9 mА для двух полос.

4. Помимо амидошварца 10В, в качестве красок применяют бромфенолблау, азокармин, нафтилшварц, нингидрин и понсорот.

5. Оценку можно произвести также прямым измерением проходящего или отраженного света с помощью фотоселеновых элементов и гальванометра.


Ссылка на данную страницу для форума:
Ссылка на данную страницу для блога:

Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э
Посвящается моему деду, доктору Фролову В.М. (1939-2014) Не пользуйтесь материалами сайта без консультации специалиста!