Проверьте зрение за 5 минут, не отходя от компьютера →
Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э

Определение инулина по Рое, Эбштейну и Гольдштейну

Принцип. Гидролитическое расщепление инулина под воздействием высокой температуры до молекул фруктозы. Количество образовавшейся фруктозы определяется фотометрически.

Реактивы.

1. Реактивы для осаждения белков по Сомоджи:

а) 10% раствор ZnSО4 + 7H2О и

б) 0,5 n раствор NaOH.

2. Реактив: резорцин — тиомочевина (0,1 резорцина и 0,25 тиомочевины растворить, хорошо перемешивая, в 100,0 ледяной уксусной кислоты и сохранять в темной бутылке).

3. 30% раствор НСl [приготовление: 5 частей концентрированной (удельный вес 1,19) соляной кислоты и 1 часть дистиллированной воды].

4. 2 мг% стандартный раствор инулина [изготовляется разведением в 50 раз маточного (100 мг%) раствора инулина].

Техника определения в плазме

1. Наливают в пробирку 3 мл плазмы, 6 мл раствора ZnSO4 (1a), 6 мл раствора NaOH (1б) и 15 мл дистиллированной воды, хорошо взбалтывают, оставляют на 10 минут стоять и фильтруют (разведение 1 : 10).

2. К 2 мл фильтрата добавляют 1 мл реактива — резорцин-тиомочевина (2) + 7 мл НСl (3), хорошо взбалтывают и ставят на 10 минут в водяную баню при 80° (до появления окрашивания).

3. После охлаждения под текущей струей воды фотометрируют.

Толщина слоя 1 — 3 см. Фильтр S 53. Раствор для сравнения — Н2O.

Техника определения в моче

Пробы мочи разводят в 500 — 1000 раз. Из этих разведений берут по 2 мл в пробирки и далее поступают так, как при определении инулина в плазме.

Рекомендуется мочу, содержащую много белка, предварительно освободить от него.

Расчет. Рассчитывают концентрацию инулина в миллиграмм-процентах и составляют кривую так же, как при определении ПАГ (стр. Определение парааминогиппуровой кислоты (ПАГ) по Смиту и сотр.).

При составлении кривой следует подготовить ряд разведений инулина с концентрациями от 5 до 0,2 мг%.

Примечания. 1. Взятие крови: к 1 мл раствора оксалата аммония (1,34% оксалат аммония в 0,85% NaCl), добавить 9 мл венозной крови. Хорошо смешать!

2. В качестве контроля рекомендуется параллельно пользоваться 2 мг% стандартным раствором.

3. Так как уже при нормальном содержании сахара крови происходит легкая цветная реакция, рекомендуется ставить контрольный опыт с нормальной мочой.

4. Ввиду того что интенсивность окраски постепенно слабеет, фотометрический отсчет следует делать не позднее 30 минут.


Ссылка на данную страницу для форума:
Ссылка на данную страницу для блога:

Алфавитный указатель по клиническим исследованиям:
А Б В Г Д Ж З И Й К Л М Н О П Р С Т У Ф Х Ц Щ Э
Посвящается моему деду, доктору Фролову В.М. (1939-2014) Не пользуйтесь материалами сайта без консультации специалиста!